La molécula
del agua está formada por dos átomos de hidrogeno y un átomo de oxigeno unidas
a través del enlace covalente. El enlace O-H es altamente polar, debido a la
alta electronegatividad del oxígeno que retira la densidad electrónica hacia si
mismo generando el momento dipolar de la molécula del agua, esta polaridad es
muy importante porque determina sus propiedades disolventes.
¿Por qué es importante el Agua?
La importancia del agua en la sociedad lo abarca
todo, siendo un insumo necesario en casi todos los sectores económicos,
especialmente la agricultura, la generación de energía y la manufactura.
El agua es un DISOLVENTE IMPORTANTE y esencial
para todos los seres vivos en el planeta Tierra. El 90 % de las personas dependen
de las aguas subterráneas para beber y otros fines. Las características del
agua cambian debido a la geología y el clima. La calidad del agua subterránea
cambia en el entorno fisicoquímico y biológico a través del cual fluye.
El agua puede considerarse
uno de los motores más importantes para la vida humana, así como para el
desarrollo social y económico. Los recursos hídricos satisfacen las necesidades
humanas más básicas de agua potable y saneamiento, al tiempo que permiten que
se lleve a cabo la agricultura de regadío y las actividades industriales como
la generación de energía térmica, la minería y la fabricación. Por lo tanto, el
uso, la gestión y la disponibilidad de los recursos hídricos desempeñan un
papel crucial en la progresión de los cambios globales en el sistema de la
Tierra. El crecimiento de la población mundial y sus necesidades han hecho
hincapié en los recursos hídricos en muchas regiones del mundo. Este problema
continuará creciendo a medida que se proyecte la población (a) aumentará un 42%
para el año 2100 a 10.9 mil millones de personas; y (b) migrar: 1.000 millones
de personas pueden convertirse en refugiados climáticos para 2050. La demanda
de agua aumenta no solo con la población sino también con el consumo de agua
per cápita.
¿Por qué decimos que el Agua es un Disolvente
Universal?
La Polaridad permite asociarse con otras moléculas del agua a través de
enlaces intermoleculares llamados puentes de hidrogeno. Cuando el agua interactúa
con moléculas de la misma polaridad (momento dipolar), estas se atraen por fuerzas
intermoleculares, por afinidad. Cuando la sal se disuelve en agua la interacción
ocurre por fuerzas Ión – Dipolo.
CICLO GLOBAL
DEL AGUA
El ciclo hidrológico describe
el flujo perpetuo y el intercambio de agua entre diferentes depósitos globales:
los océanos, la atmósfera, la superficie terrestre, los suelos, los sistemas de
aguas subterráneas y la Tierra sólida. La mayor parte del agua del mundo,
aproximadamente el 96,3%, se encuentra en los océanos del mundo, donde las
moléculas de agua tienen un tiempo de residencia promedio de unos 3300
años. Los glaciares y las capas de hielo encierran más de la mitad del
agua restante, con el 90% de esta almacenada en la capa de hielo
antártica. La mayor parte de lo que queda se encuentra debajo de la
superficie, en acuíferos subterráneos, donde vastas reservas de agua son
salinas o de difícil acceso.
¿Existe riesgo a la salud humana frente a la exposición de Asbestos o Materiales que contienen Asbestos?
Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), alrededor de 125 millones de personas en el mundo están expuestas al asbesto en el lugar de trabajo y en todo el mundo las muertes relacionadas con el asbesto son 112.000 cada año. En Europa, la amplia prohibición del amianto fue objeto de la Directiva 1999/77 / EC, que se implementará en 2005, pero desafortunadamente, cada año se registran entre 20.000 y 30.000 casos de enfermedades relacionadas con el amianto y se espera que más de 300.000 ciudadanos mueran de mesotelioma para 2030.
¿El Perú, se encuentra entre los países que regula el uso de Asbestos?
La luz tiene naturaleza dual onda-partícula, cuando se comporta como una onda oscila en diferentes direcciones donde los componentes Eléctrico y Magnético son perpendiculares. La polarización de la luz se define como la orientación preferencial de una onda electromagnética, mediante uso de un polarizador, dispositivo que solo permite el paso del componente eléctrico de la onda electromagnética.
MICROSCOPÍA DE LA LUZ POLARIZADA
El microscopio de luz polarizada se utiliza para analizar la anisotropía de las propiedades ópticas de una muestra, como la refracción y la absorción. La anisotropía óptica es una consecuencia del orden molecular, que puede hacer que las propiedades ópticas dependan de la polarización de la luz. La microscopía de luz polarizada aprovecha esta dependencia y proporciona una herramienta sensible para analizar la alineación de enlaces moleculares o formas estructurales finas en materiales naturales y artificiales.
La mayoría de las estructuras biológicas exhiben cierto grado de anisotropía que es característico de su arquitectura molecular, como las membranas y las matrices de filamentos. Una membrana se modela como una hoja de moléculas lipídicas en las que se incrustan proteínas, todas las cuales mantienen cierto grado de orientación con respecto al plano de la membrana. Por lo tanto, los tejidos, células y orgánulos que incluyen estructuras membranosas extensas, como mitocondrias y fotorreceptores, pueden exhibir birrefringencia (anisotropía de refracción) y diatenuación (anisotropía de atenuación) que son características de su composición y arquitectura molecular (1).
MICROSCOPÍA DE POLARIZACÍON DE FLUORESCENCIA
La propiedad de polarización de la fluorescencia fue descubierta por el físico francés Perrin en 1926. Bajo excitación, las moléculas fluorescentes absorben y emiten fotones en forma de radiación dipolo. Este fenómeno se llama polarización cromóforo. Los principios físicos fundamentales de la polarización de la fluorescencia se han investigado intensamente.
La microscopía de polarización de fluorescencia (FPM), también llamada microscopía de polarización basada en etiquetas, puede medir simultáneamente la intensidad del dipolo y la información de orientación para estudiar la organización de la estructura biológica subyacente. Por ejemplo, FPM se usa para monitorear el proceso de activación dinámica de proteínas de membrana.
Fig. 1. Principio analítico de la orientación del dipolo fluorescente y la configuración óptica. (A) En un sistema de coordenadas esféricas, un ángulo azimutal / y un ángulo normal h parametrizan la orientación del momento dipolar. Dos flechas rojas representan la orientación 3D y 2D, respectivamente. (B) La intensidad del fotón es la más grande ya que la orientación del dipolo es paralela a la dirección de la luz de excitación polarizada y la más débil ya que ambas direcciones son perpendiculares entre sí. (C) Los componentes de CA de la intensidad de emisión de dos dipolos se puede agregar de acuerdo con los principios de la adición de vectores. Dos flechas negras y una flecha roja se refieren a dos dipolos y su dipolo eficiente. / i y Mi representan la orientación y el fotón máximo de un solo dipolo, respectivamente. (D) Los perfiles de emisión de dos dipolos (curvas negras discontinuas) y la curva de emisión de su dipolo de conjunto equivalente (línea roja continua) bajo excitación de polarización. (E) Configuración óptica típica para excitación de polarización (PE) y detección de polarización (PD) basada en microscopio de campo amplio. Los moduladores de la excitación de polarización y la detección de polarización corresponden a los óvalos violeta y marrón de la Fig. 1G-I. (F) Esquema óptico clásico de anisotropía de fluorescencia con una excitación de polarización lineal y dos direcciones de observación que son paralelas y perpendiculares al ángulo de excitación de polarización respectivamente. (G) Configuración de detección de polarización con iluminación de polarización isotrópica para analizar el dipolo de emisión. (H) Esquema de excitación de polarización para acceder al dipolo de absorción. (I) Excitación de polarización simultánea y detección de polarización para determinar el dipolo de emisión y absorción. (J) Análisis del patrón de difracción desenfocado para resolver el dipolo de emisión. (Para interpretar las referencias al color en la leyenda de esta figura, los lectores pueden consultar la versión web de este artículo).
El principio central de FPM es extraer la orientación del momento dipolar y la orientación de mayor resolución accede a una observación más detallada (2).
Aplicaciones
biológicas de Microscopía de polarización de fluorescencia (FPM)
FPM
detecta tanto la información de fluorescencia como de orientación, que es
esencial para una multitud de observaciones biológicas y una mayor comprensión
de las funciones y procesos celulares. Superresolution FPM se ha desarrollado
recientemente para llevar el FPM limitado por difracción convencional a una
escala completamente nueva, de modo que el conjunto del número de dipolos se
puede reducir y la orientación se puede detectar. Se conocen dos categorías de
aplicaciones biológicas: interacción cromóforo-molécula objetivo y organización
molecular.
Interacción
cromóforo molécula-objetivo
En
las ciencias de la vida, la proteína fluorescente y el colorante químico son
los cromóforos más utilizados. Las imágenes FPM pueden revelar la interacción
de polarización entre el cromóforo y la molécula objetivo. Para crear un
enlazador rígido entre la proteína de fluorescencia verde (GFP) y la septina,
una parte de la hélice a del extremo N de la GFP truncada se puede fusionar a
otra parte de la hélice a del CDC3 truncado del extremo C, para formar una
completa -Hélice con suficiente rigidez para la obtención de imágenes PFM.
Fig.
2. Caracterización de la molécula cromóforo-objetivo.(A) Diagrama del
cromóforo (óvalo rosa) que se une a la molécula objetivo (varilla gris poco
profunda). (B) La formación de imágenes de orientación de la estructura de
reloj de arena con las construcciones Cdc12-conGFP3 y Cdc12-conGFP4 fusionadas
en septin, que exhibe una relación de orientación ortogonal de las dos
construcciones. (C) La imagen polar-dSTORM de fibra de actina marcada con Alexa
Fluor 488. La apertura angular / es pseudocoloreada. (D) Diagrama esquemático
del modo de unión de los tintes bis-intercaladores, intercaladores y tintes de
unión de surcos. (E) Imagen de polarización fluorescente del ADN del fago
lambda teñido con TOTO-1. (F) Imágenes de ADN probadas intercalando el
colorante SYTOX Orange. (G) Interacción in vitro entre el ADN y el colorante
unido a surcos SiRHoechst. (H) La flexión local (marcada con una punta de
flecha) de la hebra de ADN, sondada por YOYO-1 bis-intercalante, se detecta
mediante análisis de polarización.
Organización
molecular
Las
imágenes FPM podrían usarse para estudiar el comportamiento de la estructura y dinámica
de la proteína objetivo. La medición de la orientación dipolar de una sola
molécula proporciona a los biólogos una visión incomparable de los sistemas
poliméricos como la agregación de macromoléculas, orden de filamentos
biológicos (citoesqueleto y fibra de ADN) y dinámica de partículas
individuales, donde la FPM puede proporcionar una mejor visión de conjunto. A
través del análisis de anisotropía de fluorescencia, FPM revela una disposición
paralela de nucleoporina humana Nup133-Nup107 y nucleoporina de levadura Nic96
al plano de la envoltura nuclear. Esta observación apoya el modelo de
"anillo de cabeza a cola" según el cual los subcomplejos en forma de
Y forman un anillo octamérico a través de la interacción entre el extremo y los
brazos cortos de los subcomplejos (Fig. 3A).
Fig.
3. Organización estructural observada con FPM. (A) Ambos ejes largos (marcados
por u) de la levadura Nic96 y Nup133-Nup107 humanos se orientan aproximadamente
perpendiculares al eje nucleocitoplasmático (marcado por N), que sostiene la
disposición de anillos planos de cabeza a cola formados por los subcomplejos en
forma de Y. (B) Dinámica estructural de septin durante la división de la
levadura de estructura de reloj de arena a estructura de doble anillo. (C) En
la formación de imágenes del anillo de actina marcado con faloidina en los
axones de las neuronas, pSIM revela la organización lado a lado de los
filamentos cortos de actina para formar la estructura del anillo de actina. (D)
El motor de miosina gira ~ 90 cada paso mientras camina sobre el filamento de
actina. Dos óvalos y dos cintas expresan la miosina V e indican la cabeza y el
cuello, respectivamente. Las orientaciones de los dos dominios están marcadas
con una línea roja y una línea azul, respectivamente. El recuadro es el
histograma de la rotación promedio con un pico en 87 (n = 320). (E) Los
intercaladores perpendiculares e inclinados ocurren en la transición y están
flanqueados por B-DNA y S-DNA, respectivamente. (F) Se presentan imágenes de
polarización de partículas SERS en macrófagos vivos y la dirección de la flecha
representa el azimut de las partículas SERS. (G) La trayectoria de movimiento y
la información de rotación de partícula SERS única.
REFERENCIAS
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https://doi.org/10.1016/j.csbj.2020.06.038
El plomo es un elemento químico que
no es esencial para la salud humana, es un metal pesado que es más denso
que la mayoría de los elementos metálicos, suave y maleable con punto de
fusión relativamente bajo (327.5 °C).
fig. 1. Plomo elemental en sus diferentes presentaciones
El plomo se ha utilizado de diversas
formas a lo largo de la historia. Actualmente se utiliza para baterías de
almacenamiento de plomo-ácido, con fines de construcción, para revestimiento de
cables, blindaje contra radiación y en aleaciones. En forma de polvo, se
utiliza en pinturas, pigmentos, pastas, vidrio, esmaltes y cerámicas
funcionales 1.
La exposición al plomo en los seres
humanos se produce principalmente a través de alimentos y bebidas, incluidos
los alimentos almacenados en latas soldadas con plomo y cerámica vidriada con
plomo. La ingesta diaria actual en los países industrializados está en el
rango de 8-282 μg, con una ingesta diaria promedio inferior a
100 μg.
fig. 2. Exposición humana a compuestos de plomo
Al ser un metal tóxico, el plomo
afecta a varios sistemas de órganos del cuerpo, los sistemas nerviosos
hematopoyético, cardiovascular, central y periférico. Los bebés y los
niños son más vulnerables a la toxicidad por plomo, produce encefalopatía en
niños con exposición aguda al plomo.
Los problemas asociados con la
exposición al plomo en humanos se han vuelto menos severos durante las últimas
décadas debido a la eliminación de la gasolina con plomo y un mejor control
ambiental y ocupacional. Evitar la fuente de exposición y la terapia de
quelación son adecuadas para el manejo del envenenamiento por plomo
¿COMO SE
INCORPORA EL PLOMO A CUERPOS DE SUELO?
EN FORMA INORGÁNICO, PLOMO ELEMENTAL
Una de
las formas de incorporación a cuerpos de suelo es en su forma inorgánica. El
plomo es el material principal utilizado para la producción de municiones,
debido a su alta gravedad específica, trabajabilidad y facilidad para fundirse.
Las municiones (balas, perdigones) se componen principalmente de Pb (90-99% en
peso). Este plomo depositado en el suelo se oxida a sus formas móviles como
Pb2+ y Pb4+ y pueden ser absorbidos por la raíz de las plantas y los
macroorganismos del suelo
Se estima
que existen 100,000 campos de tiro en todo el mundo, donde hasta 72,600
toneladas de Pb de municiones se esparcen en el suelo cada año (Xifra Olivé,
2006; Perroy et al., 2014)
Fig. 3. comportamiento ecotoxicológico y químico
del Pb en el suelo (PAHs: hidrocarburos aromáticos policíclicos) 2
EN FORMA
ORGÁNICO, COMO COMPUESTO TETRAETILO DE PLOMO C8H20Pb
La exposición humana al plomo (Pb) es
un creciente problema de salud pública mundial. Debido al grave riesgo
para la salud, la comunidad internacional, liderada por el Programa de las
Naciones Unidas para el Medio Ambiente (PNUMA) y la Organización Mundial de la
Salud (OMS), han estado apoyando activamente la eliminación mundial de la
pintura a base de plomo para 20203.
Fig. 4. Principales fuentes de contaminación de
suelo por compuestos orgánico de plomo 4.
El suelo puede contaminarse con polvo de pintura
con plomo y astillas de pintura de actividades como renovación, repintado o
demolición de viviendas y otras estructuras pintadas, o por la combustión
histórica de gasolina con plomo. El suelo contaminado es uno de los principales
contribuyentes a los niveles elevados de plomo en sangre en los niños.
¿EXISTEN CASOS
DE ENVENAMIENTO POR PLOMO?
En el
2002 Gordon y colaboradores, en un estudio realizado reportaron 3 casos de
pacientes luego de exposición al plomo.
CASO
1: Un pintor y decorador de 40 años
se presentó con un historial de 6 semanas de malestar, calambres abdominales,
náuseas, artralgias y deterioro mental leve. Anteriormente había estado
trabajando en un edificio georgiano en Bath usando un soplete industrial y una
lijadora para quitar la pintura. Dos de los tres pisos tenían paredes con
paneles de madera; todos tenían de 8 a 10 capas de pintura y algunos eran
claramente muy viejos. Aunque había adquirido un respirador nuevo, no lo
usaba cuando otros trabajadores quemaban o lijaban en otras habitaciones del
mismo piso, y durante los descansos comía, bebía y fumaba cigarrillos en el
mismo edificio. No se realizaron mediciones de las concentraciones de
plomo atmosférico.
CASO
2: Un decorador autónomo de 51 años
se presentó a su médico de cabecera con un historial de 4 semanas de náuseas,
estreñimiento, dolores de cabeza, mareos intermitentes y parestesias y
debilidad en las manos. Dijo que había experimentado una exposición
prolongada a la pintura con plomo mientras redecoraba una casa de la regencia
tardía (alrededor de 1820) en Bath. Su plomo en sangre inicial fue de
4,04 µmol l -1 (84,2 µg 100 ml -1). no se detectaron
anomalías en el examen físico.
CASO
3: Un hombre de 22 años se presentó
con un historial de 2 semanas de letargo, malestar general, dolores de cabeza,
náuseas y dolor abdominal tipo cólico. Había estado trabajando en el mismo
sitio que el caso 1, aunque de forma intermitente durante 12 semanas. Su
nivel de plomo en sangre era de 4,09 µmol l -1 (85,2 µg 100
ml -1). En el examen se observó anemia, pero por lo demás estaba bien
y no presentaba ningún deterioro neurológico o intelectual. La
investigación mostró: Hb 9,7 g 100 ml -1 con policromasia moderada y
punteado basófilo de los glóbulos rojos. por lo demás, su recuento
sanguíneo estaba dentro de los límites normales, al igual que sus electrolitos
y pruebas de función hepática 5
¿QUÉ MÉTODOS
NORMALIZADOS EXISTEN PARA CUANTIFICAR PLOMO SUELO?
En los Estándares
de Calidad Ambiental (ECA) dada a través delDECRETO SUPREMO N°002-2013-MINAM
6, establece dos métodos
de ensayo normalizados de la EPA (Agencia de Protección Ambiental de los
Estados Unidos): METHOD 3050-B y METHOD 3051
METHOD
3050-B (ACID DIGESTION OF SEDIMENTS, SLUDGES, AND SOILS)
Este método ha sido escrito para
proporcionar dos procedimientos de digestión separados, uno para la preparación
de sedimentos, lodos y muestras de suelo para análisis por espectrometría de
absorción atómica de llama (FLAA) o espectrometría de emisión atómica de plasma
acoplado inductivamente (ICP-AES) y otro para la preparación de sedimentos,
lodos y muestras de suelo para el análisis de muestras por Horno de grafito AA
(GFAA) o espectrometría de masas de plasma acoplado inductivamente (ICP-MS). Los
extractos de estos dos procedimientos no son intercambiables y solo deben
usarse con las determinaciones analíticas descritas en esta sección. Las
muestras preparadas mediante este método pueden ser analizadas por ICPAES o
GFAA para todos los metales enumerados siempre que los límites de detección
sean adecuados para el uso final requerido de los datos. Se pueden utilizar
técnicas determinativas alternativas si son científicamente válidas y se pueden
alcanzar los criterios de CC del método, incluidos los relacionados con las
interferencias.
METHOD
3051 (MICROWAVE ASSISTED ACID DIGESTION OF SEDIMENTS, SLUDGES, SOILS, AND OILS)
Este método de extracción por microondas
está diseñado para imitar la extracción mediante calentamiento convencional con
ácido nítrico (HNO3) o, alternativamente, ácido nítrico y ácido clorhídrico
(HCl), de acuerdo con el método EPA 200.2 y el método 3050. Dado que este
método no está destinado a lograr la descomposición total de la muestra, es
posible que las concentraciones de analito extraído no reflejen el contenido
total de la muestra. Este método es aplicable a la extracción / disolución
ácida asistida por microondas de sedimentos, lodos, suelos y aceites.
¿COMO DETERMINAR LA TOXICIDAD
DEL PLOMO?
En general, la contaminación por metales pesados
en los ecosistemas acuáticos es un problema urgente y recurrente para la
preservación de la biodiversidad y la salud humana. La contaminación por
metales pesados se asocia principalmente a residuos de actividades mineras e
industriales, y descargas ambientales de lodos de depuradora doméstica tratados
y no tratados. Un gran número de estudios muestran que los metales pesados
pueden ejercer efectos toxicológicos en los organismos acuáticos a concentraciones
controladas en aguas superficiales con notable presión antropógeno.
El efecto toxicológico de los metales pesados en
los organismos acuáticos depende en gran medida de la concentración de
exposición, su especiación en condiciones ambientales y su naturaleza, es
decir, metales esenciales frente a no esenciales. Por ejemplo, metales
esenciales como el zinc o el cadmio son elementos clave para el crecimiento de
los organismos vivos. Sin embargo, en grandes dosis, estos metales pueden
inhibir el crecimiento, reducir la endocitosis y las tasas de absorción de
alimentos y concentrarse en la membrana celular, lo que conduce a la rotura y
lisis celular. Por otro lado, los metales no esenciales como el plomo y el
mercurio se unen a grupos que contienen tiol y sitios de oxígeno, causan
alteraciones en la estructura configuracional de ácidos nucleicos y proteínas e
interfieren con la fosforilación oxidativa y el equilibrio osmótico de células
y organismos.
La evaluación del riesgo ecotoxicológico de los
metales pesados generalmente implica el desarrollo de concentraciones umbral
basadas en datos de toxicidad para un número limitado de especies de prueba
estándar (es decir, algas, microcrustáceos, peces) y la aplicación de factores
de evaluación. Se espera que los factores de evaluación tengan en cuenta las
diferencias de sensibilidad entre especies, de modo que el umbral derivado las
concentraciones también pueden proteger organismos de ensayo no estándar 7.
ENSAYOS ECOTOXICOLÓGICOS CON ESPECIES ACUATICAS
Prueba de inhibición de la bioluminiscencia de V.
fischeri
Se realizan pruebas de Microtox® para evaluar la
toxicidad de muestras de suelo después de 5, 15 y 30 min de exposición a la
bacteria marina V. fisheri, siguiendo la Prueba Microtox® Basic Solid-Phase
Test (BSPT) y utilizando un Analizador Microtox 500. Se prueba 7 ± 0.01 g de
suelo como suspensiones preparadas con 35 ml de diluyente de prueba en fase
sólida agitado magnéticamente durante 10 min y, diluido a una serie de nueve
concentraciones, separado por un factor de dilución de 2. Los resultados se expresan
como porcentaje de inhibición de bioluminiscencia después de 30 min de
exposición.
Prueba de
inmovilización aguda de D. magna
Se realiza
una prueba de inmovilización aguda de 48 h de D. magna para probar la toxicidad
de los diferentes elutriatos preparados a partir de todas las muestras de suelo.
Los elutriados del suelo se preparan agitando una suspensión de suelo / medio
ASTM (1: 4 m / v) durante 24 h. Se prueba una serie de diluciones (0, 13, 19,
29, 44, 66 y 100%) de elutriatos del suelo. Después de agitar, los elutriados
se dejan reposar durante 12 h y se decanta antes del análisis.
Ensayos
de inhibición del crecimiento de algas de agua dulce
La prueba
de crecimiento de 72 h de R. subcapitata se realiza en elutriatos preparados de
todos los suelos siguiendo el mismo procedimiento descrito anteriormente, pero
esta vez utilizando el medio Woods Hole MBL, para criar cultivos de esta
especie en el laboratorio. La prueba se lleva a cabo siguiendo la directriz de
prueba 201 de la OCDE (OCDE, 2011), en microplacas estériles de 24 pocillos,
bajo iluminación fluorescente blanca fría continua (temperatura 21 ° ± 2 ° C). Se
ensaya una serie de diluciones (0, 13, 19, 29, 44, 66 y 100%) de cada elutrido.
Para cada dilución se preparan 4 réplicas (pocillos) que contiene 900 µl de
elutriado y 100 µl de inóculo de algas preparado para comenzar con una densidad
celular inicial de 10-4 células / ml en todos los pocillos. Se preparan CTL (2
por placa) con medio ASTM. Al final del tiempo de exposición (72 h), se determina
la tasa de crecimiento de algas (expresada como un cambio en el número de
células de algas / día) después del recuento de células microscópicas en una
cámara de Neubauer. Se preparan cuatro réplicas para cada dilución de elutrido
y el control (CTL con medio ASTM solamente) con cinco neonatos de 24 horas y 25
ml cada uno. No se proporcionó comida durante el período de prueba. Después de
períodos de exposición de 24 y 48 h, se comprueba la inmovilización de los
dáfnidos. Los resultados se expresan como porcentajes de inmovilización en la
concentración del 100% de cada elutrido, ya que estos fueron los valores
utilizados para el cálculo del riesgo.
ENSAYOS
ECOTOXICOLÓGICOS CON ESPECIES TERRESTRES: E. andrei
Prueba de
reproducción
Se realiza
una prueba de reproducción con E. andrei (56 días) para evaluar la toxicidad
del suelo siguiendo la directriz estándar OCDE 222 (OCDE, 2004a, 2004b). Los
organismos se obtienen de cultivos de laboratorio criados en grandes
contenedores, bajo condiciones controladas: temperatura (20 ± 2 ° C) y
fotoperiodo (16 hL: 8 hD). Las lombrices de tierra se suelen mantener en un
sustrato compuesto por turba, estiércol de caballo seco y descompuesto y agua,
siendo periódicamente humedecido, monitoreado y renovado (Gavina et al., 2016).
Las pruebas se realizan en envases de plástico con 500 g (secos peso, ps) de
cada suelo con contenido de agua ajustado al 40% de su WHC máxima. Se agregan
diez lombrices de tierra adultas cliteladas (peso entre 300 y 600 mg) a cada
réplica (cuatro réplicas por suelo), y permanecieron allí durante 28 días. Se
añade cada semana estiércol de caballo seco y desnutrido (5 g) durante el
período de prueba, así como agua desionizada, cuando fue necesario, para
mantener el contenido de agua del suelo. Después de 28 días de exposición, los
adultos se extrajeron suavemente de los recipientes de prueba clasificándolos a
mano, contados y pesados. Al final del ensayo de reproducción (56 días de
exposición), se saca los juveniles de los contenedores. Los contenedores se
colocan en un baño de agua a 60 ° C y se contaron los juveniles a medida que
emergían a la superficie del suelo2.
REFERENCIAS
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